Dirett RT-qPCR Kit II
Deskrizzjoni tal-Kit:
◮Kit RT-qPCR dirett, bl-użu ta 'Foreasy Reverse Transcriptase u Foreasy HS Taq DNA Polymerase li qed jiżviluppaw minn Foregene, b'buffer ta' reazzjoni unika, jagħmel dan il-kit b'reżistenza qawwija u kompatibilità, u jista 'jittestja direttament ir-reazzjoni juża s-sistema Foregene Lysis bħala mudell.Dan il-kit jista 'japplika għal kit ta' skoperta ta 'aċidu nuklejku COVID-19 u żvilupp ta' kit ta 'skoperta ta' aċidu nuklejku ta' batterji patoġeniċi oħra.
Deskrizzjoni
Il-Kit RT-qPCR dirett jipprovdi buffer RT-qPCR ippakkjat separatament, Foreasy HS Taq DNA Polymerase ta' effiċjenza għoljau Foreasy Reverse Transcriptase (MMLV),jagħmilha konvenjenti għall-ħolqien ta 'kits back-end u aġġustament tas-sistema, fi ħdan verifika sempliċi.
Kit RT-qPCR dirett, bl-użu ta 'Foreasy Reverse Transcriptase u Foreasy HS Taq DNA Polymerase li qed jiżviluppaw minn Foregene, b'buffer ta' reazzjoni unika, jagħmel dan il-kit b'reżistenza qawwija u kompatibilità, u jista 'jittestja direttament ir-reazzjoni juża s-sistema Foregene Lysis bħala mudell.Dan il-kit jista 'japplika għal kit ta' skoperta ta 'aċidu nuklejku COVID-19 u żvilupp ta' kit ta 'skoperta ta' aċidu nuklejku ta' batterji patoġeniċi oħra.
Dan il-kit jista 'jkun direttament il-komponent tal-prodott IVD, bl-użu faċilment u veloċi.Jeħtieġ biss verifika faċli, mingħajr ma jerġa 'jiżviluppa.
Speċifikazzjonijiet
500T, 50,000T
Komponenti tal-kit
| Kontenut tal-kit (20 μL sistema ta' reazzjoni) | IM-05111-02 | IM-05112-02 |
| 500 T | 50,000 T | |
| Foreasy RTranscriptase everse (200 U/μL) | 50 μL×1 | 1 mL×5 |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 100 μL×1 | 1 mL×10 |
| 2 × RT-qPCR DirettBuffer | 1 mL ×5 | 500 mL ×1 |
| Istruzzjoni | 1 | 1 |
Passi Operattivi
A: Ipprepara mudell u reaġent
1. Ipprepara mudell ta 'RNA ppreparat (Huwa rakkomandat li tuża kit tas-serje Foregene Total RNA Isolation Kit biex tiġbed u tippurifika RNA template) jew prodott ta' qsim tal-kampjun (Huwa rakkomandat li tuża sistema Foregene Lysis), primers speċifiċi (10 μM) u konsumabbli rilevanti oħra, strument.
2. Poġġi l-2× Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O u 20× ROX Reference Dye (jekk ikun meħtieġ) fil-kaxxa bis-silġ, jagħmlu dawn idub b'mod naturali, u mħallta bil-mod.
B: Ipprepara tas-sistema RT-qPCR
Ikseb nofs il-volum tal-buffer ta' reazzjoni tas-sistema ta' reazzjoni (per eżempju, jekk il-volum tas-sistema huwa 20 μL, jeħtieġ li tikseb 10 μL 2× Direct RT-qPCR Buffer). Għalammont korrispondenti ta' enzima, nissuġġerixxu liM-MLV: sistema ta 'reazzjoni 10-30 U/20 μL,TaqDNA polimerażi：Sistema ta 'reazzjoni 1-2 U/20 μLdan huwa s-suġġeriment tagħna, għandek tittestja u taġġustah), żid RNA template, primers speċifiċi u sondi, u żid RNase-Free ddH2O sa 20 μL.Il-preparazzjoni speċifika tas-sistema ta 'reazzjoni RT-qPCR tista' tiġi riferita għat-tabella 1 li ġejja.
Tabella 1: Ipprepara s-sistema RT-qPCR
| Komponent | Volum | Konċentrazzjoni finali |
| 2 × Buffer RT-qPCR Dirett | 10 μL | 1× |
| Foreasy Reverse Transcriptase (MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase | 1-2 U | |
| Il-Primer quddiem (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Reverse Primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Sonda (4 μM) | 1 μL | 200nM |
| Mudell (RNA jew Lysate) | X μL | |
| 20 × Żebgħa ta 'Referenza ROX | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Volum Totali | 20 μL |
Nota: Forward Primer u Reverse Primer huma primers speċifiċi tal-ġene fil-mira.Is-sistema tal-qPCR tista 'tiġi aġġustata skont mudelli prattiċi sperimentali u PCR.Nirrakkomandaw 400nM għall-konċentrazzjoni finali tal-biċċa l-kbira tal-primers.Aġġusta l-volum ta 'primers u sondi speċifiċi skond il-konċentrazzjoni ppreparata u l-konċentrazzjoni finali rakkomandata, jekk jogħġbok.
1*: Agħżel il-konċentrazzjoni finali xierqa taż-Żebgħa ta' Referenza ROX skont strumenti PCR kwantitattivi differenti.L-aħjar konċentrazzjoni ROX Reference Dye ta’ strumenti PCR kwantitattivi komuni tidher fit-tabella li ġejja:
| Strumenti kwantitattivi PCR | Konċentrazzjoni finali ta 'ROX Reference Dye |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/L-Ewwel Pass,eċċ. | 1× (per eżempju, żid 1μl 20×ROX Reference Dye f'20 μL sistema ta' reazzjoni) |
| ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P, Mx3005P u Mx4000, eċċ. | 0.5× (per eżempju, żid 0.5μl 20×ROX Reference Dye f'20 μL sistema ta' reazzjoni) |
| Strument Roche PCR, strument Bio-Rad PCR, strument PCR kwantitattiv Eppendorf, eċċ. | Mingħajr Żebgħa ta' Referenza ROX |
Ħażna u Żmien kemm idum tajjeb
Il-kit għandu jinħażen f'-20 ± 5℃.Għandu immedjatament jinħażen fi friġġ termostatiku -20℃.Il-perjodu ta' validità huwa ta' sentejn jekk jinħażen f'kondizzjoni xierqa.
