Protokoll tat-Tessut tal-Annimali Direct PCR kit-UNG (mingħajr Għodod ta' Teħid ta' Kampjuni).
Deskrizzjoni tal-Kit:
Uża direttament lisat tat-tessut tal-annimali bħala mudell għall-amplifikazzjoni tal-PCR, mingħajr estrazzjoni separata tad-DNA, sensittività veloċi u għolja.Miżjud sistema UNG kontra t-tniġġis biex telimina pożittivi foloz.
◮Mhi meħtieġa l-ebda purifikazzjoni tad-DNA li tieħu ħafna ħin u li tiswa ħafna flus.
◮Id-domanda tal-kampjun hija żgħira, ħu żerriegħa waħda biss.
◮Ma huma meħtieġa l-ebda trattamenti speċjali bħal tħin u tgħaffiġ, u l-operazzjoni hija sempliċi.
◮Is-sistema PCR ottimizzata tippermetti lill-PCR li jkollu speċifiċità ogħla u tolleranza aktar b'saħħitha għall-inibituri tar-reazzjoni tal-PCR.
Deskrizzjonijiet
Dan il-kit juża sistema unika tal-liżi buffer biex jirrilaxxa malajr DNA ġenomika minn kampjuni ta 'tessut tal-annimali għal reazzjonijiet PCR, għalhekk huwa partikolarment adattat għal ttestjar ġenetiku fuq skala kbira.
Il-proċess tar-rilaxx tad-DNA ġenomika mill-liżi buffer jitlesta fi żmien 10-30 minuta f'65°C.L-ebda proċess ieħor bħat-tneħħija tal-proteini u l-RNA mhu meħtieġ, u t-traċċa tad-DNA rilaxxata tista 'tintuża bħala mudell għar-reazzjoni tal-PCR.
2 × PCR FaċliTMĦallat (UNG) juża dUTP minflok dTTP fuq il-bażi ta '2 × PCR EasyTMĦallat, u żżid l-enzima UNG (Uracil-N-glycosylase) li tista 'tiddegrada l-mudell li jkun fih dUTP fl-istess ħin.Qabel ir-reazzjoni tal-PCR, l-enzima UNG tintuża biex tiddegrada l-prodott tal-PCR li fih l-uracil.L-enzima UNG ma jkollha l-ebda effett fuq il-mudell li ma fihx uracil, u b'hekk tiżgura l-ispeċifiċità u l-eżattezza tal-amplifikazzjoni u tevita l-possibbiltà ta 'kontaminazzjoni tal-prodotti tal-PCR waqt ttestjar ġenetiku fuq skala kbira.
D-Taq DNA polymerase hija DNA polimerażi żviluppata apposta minn Foregene għal reazzjonijiet diretti ta' PCR.D-Taq DNA polymerase għandha tolleranza qawwija għal varjetà ta 'inibituri ta' reazzjoni PCR, u tista 'tkabbar b'mod effiċjenti ammonti ta' traċċi ta 'DNA f'diversi sistemi ta' reazzjoni kumplessi, u l-veloċità ta 'amplifikazzjoni tista' tilħaq 2Kb/min, li hija speċjalment adattata għal reazzjoni diretta tal-PCR.
Komponenti tal-kit
| Parti I | Buffer AL |
| Foregene Protease | |
| 6 × DNA Loading Buffer | |
| Parti II | 2 × PCR FaċliTMĦallat (UNG) |
Karatteristiċi u vantaġġi
■L-ebda purifikazzjoni tad-DNA li tieħu ħafna ħin u li tiswa ħafna flus
■ Id-domanda tal-kampjun hija żgħira, mill-inqas 5mg tessut tal-annimali jista 'jiġi ttestjat.
■ L-ebda trattament speċjali bħal tħin u tgħaffiġ mhu meħtieġ, u l-operazzjoni hija sempliċi.
■ Is-sistema PCR ottimizzata tagħmel il-PCR ikollu speċifiċità ogħla u tolleranza aktar b'saħħitha għall-inibituri tar-reazzjoni tal-PCR.
■ Sistema PCR kontra t-tniġġis 2×PCR FaċliTMĦallat (UNG) jelimina b'mod effettiv it-tniġġis ikkawżat minn prodotti PCR u jiżgura l-ispeċifiċità u l-eżattezza tal-amplifikazzjoni.
Parametri tal-kit
Applikazzjoni: varjetà ta 'tessuti ta' l-annimali.
DNA rilaxxat mil-liżi tal-kampjun: użat biss bħala mudell tal-PCR.
Il-kit jista 'jintuża għall-għanijiet li ġejjin: identifikazzjoni ta' transġenożi, ġenotipi tal-annimali, eċċ.
Fluss tax-xogħol
Ħażna u Żmien kemm idum tajjeb
Parti I ta 'dan il-kit għandha tinħażen f'2-8℃.
Ir-reaġent Buffer AL jista' jinħażen għal 12-il xahar taħt kundizzjonijiet niexfa;jista 'jinħażen f'2-8℃għal ħażna itwal.
Reaġent Foregene Protease għandu formula unika.Biex tiżgura l-attività u l-istabbiltà tagħha, jekk jogħġbok aħżen f'4℃għal 12-il xahar.
Reaġent 6×DNA Loading Buffer jista' jinħażen f'4℃jew -20℃għal żmien twil.
Parti II ta 'dan il-kit għandha tinħażen f'-20℃.
Reaġent 2×PCR FaċliTMĦallat (UNG), jekk tintuża ta 'spiss, tista' wkoll tinħażen f'4℃għal ħażna għal żmien qasir (uża fi żmien 10 ijiem).
