Issa għandna waħda mill-magni tal-produzzjoni l-aktar avvanzati, inġiniera u ħaddiema b'esperjenza u kwalifikati, sistemi ta 'ġestjoni tal-kwalità meqjusa u appoġġ ta' bejgħ ta 'qabel/wara l-bejgħ ta' grupp ta 'ħiliet ħbiberija għal Prezz ikkwotat għal Virus ta' Rendiment Rapidu u Għoli Total Rna Isolation Extraction Purification Kit Nucleic Acid Detection Kit, "Making the Products of Large Quality" is definetely the everlasting purpose of our enterprise.Nagħmlu ħidmiet bla waqfien biex inkunu nafu l-mira ta’ “Aħna Dejjem Inżommu fil-Pass flimkien mal-Ħin”.
Issa għandna waħda mill-magni tal-produzzjoni l-aktar avvanzati, inġiniera u ħaddiema b'esperjenza u kwalifikati, sistemi ta 'ġestjoni tal-kwalità meqjusa u appoġġ ta' qabel/wara l-bejgħ ta 'grupp ta' bejgħ tas-sengħa amikevoli għalReaġenti tad-DNA Rna Universali taċ-Ċina u Purifikazzjoni Awtomatika ta 'Aċidu Nuklejku, Sabiex inwettqu l-għan tagħna ta '"klijent l-ewwel u benefiċċju reċiproku" fil-kooperazzjoni, aħna nistabbilixxu tim ta' inġinerija professjonali u tim tal-bejgħ biex nipprovdu l-aħjar servizz biex jissodisfaw ir-rekwiżiti tal-klijenti tagħna.Merħba inti tikkoopera magħna u tingħaqad magħna.Aħna l-aħjar għażla tiegħek.
Manwali ta' Istruzzjonijiet:Pjanti Total RNA Isolation Kit Plus Manwal ta 'Istruzzjoni

Issa għandna waħda mill-magni tal-produzzjoni l-aktar avvanzati, inġiniera u ħaddiema b'esperjenza u kwalifikati, sistemi ta 'ġestjoni tal-kwalità meqjusa u appoġġ ta' bejgħ ta 'qabel/wara l-bejgħ ta' grupp ta 'ħiliet ħbiberija għal Prezz ikkwotat għal Virus ta' Rendiment Rapidu u Għoli Total Rna Isolation Extraction Purification Kit Nucleic Acid Detection Kit, "Making the Products of Large Quality" is definetely the everlasting purpose of our enterprise.Nagħmlu ħidmiet bla waqfien biex inkunu nafu l-mira ta’ “Aħna Dejjem Inżommu fil-Pass flimkien mal-Ħin”.
Prezz ikkwotat għalReaġenti tad-DNA Rna Universali taċ-Ċina u Purifikazzjoni Awtomatika ta 'Aċidu Nuklejku, Sabiex inwettqu l-għan tagħna ta '"klijent l-ewwel u benefiċċju reċiproku" fil-kooperazzjoni, aħna nistabbilixxu tim ta' inġinerija professjonali u tim tal-bejgħ biex nipprovdu l-aħjar servizz biex jissodisfaw ir-rekwiżiti tal-klijenti tagħna.Merħba inti tikkoopera magħna u tingħaqad magħna.Aħna l-aħjar għażla tiegħek.

Il-kolonna pplaggjat

Wara li l-kolonna pplaggjata, ir-rendiment tal-RNA huwa mnaqqas jew saħansitra impossibbli li jiġi purifikat l-RNA, u l-massa tal-RNA miksuba hija baxxa.

Analiżi tal-kawża komuni:

1. Pawżi tal-kampjuni mhumiex bir-reqqa.

Il-ksur tal-kampjun ma jikkawżax kompletament l-imblukkar tal-KOLONNA tat-TINDIF tad-DNA, filwaqt li taffettwa r-rendiment u l-kwalità tal-RNA.Nirrakkomandaw operazzjoni rapida tat-tħin f'nitroġenu likwidu suffiċjenti meta kissret il-kampjuni, Ipprova tfarrak il-ħajt taċ-ċellula tal-kampjun, il-membrana taċ-ċellula u tessut ieħor.Għal kampjuni ta 'pjanti ta' polyol polysaccharides, nirrakkomandaw li tuża Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

2. Meta tiġbed is-supernatant tal-kampjun separat bil-Kolonna tat-Tindif tad-DNA, il-preċipitat frammentat taċ-ċellula possibbli jista' jittieħed man-nifs.

Is-sedimenti frammentati taċ-ċelluli meħuda se jikkawżaw il-Kolonna RNA BISS li tkun imblukkata meta titwettaq l-operazzjoni ta 'adsorbiment ta' RNA (ara l-pass 6).Nirrakkomandawlek bir-reqqa meta tiġbed dan is-supernatant biex tevita li d-debris taċ-ċelluli jiġi miġbud.

3. L-ammont inizjali tal-kampjun huwa wisq.

Użu eċċessiv tal-kampjun jirriżulta fi frammentazzjoni mhux kompluta tal-kampjun jew liżi taċ-ċelluli mhux kompluta minn Buffer PSL1, li jirriżulta fl-imblukkar tal-kolonna tal-purifikazzjoni waqt il-purifikazzjoni.Kit tal-Iżolament tal-RNA Totali tal-Pjanti Kull kampjun operattiv ippurifikat huwa 50 mg.Għal kampjuni ta 'pjanti ta' polyol polysaccharides, nirrakkomandaw li tipprova Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

4. It-temperatura taċ-ċentrifuga hija baxxa wisq.

Il-proċess kollu ta 'iżolament u purifikazzjoni tal-RNA jitwettaq f'temperatura tal-kamra (20-25°C), ħlief li t-tessut tal-kampjun huwa miksur minn nitroġenu likwidu. It-temperatura ta 'xi ċentrifugi krijoġeniċi hija inqas minn 20℃, li jista' jikkawża l-imblukkar tal-Kolonna tat-Tindif tad-DNA u/jew tal-Kolonna tal-RNA biss.Jekk jiġri dan, issettja t-temperatura taċ-ċentrifuga għal 20-25℃, ukun żgur li t-taħlita tal-liżi u/jew is-supernatant miżjud bl-etanol kien imsaħħan minn qabel għal 37°C.

L-ebda RNA estratt jew rendiment ta 'RNA huwa baxx

Normalment ikun hemm ħafna fatturi li jaffettwaw l-effiċjenza tal-irkupru, bħal: kontenut ta 'RNA tal-kampjun, metodu ta' tħaddim, il-volum ta 'eluzzjoni, eċċ.

Analiżi tal-kawżi komuni kif hawn taħt:

1.Twettqet ċentrifugazzjoni ta 'banju tas-silġ jew temperatura baxxa (4 ° C) matul l-operazzjoni.

Suġġeriment: Opera f'temperatura tal-kamra (15-25°C) fil-proċess kollu, ma tagħmilx banju tas-silġ u ċentrifugazzjoni f'temperatura baxxa.

2.L-RNA ġie degradat minħabba preservazzjoni mhux xierqa tal-kampjun jew preservazzjoni fit-tul tal-kampjun.

Rakkomandazzjoni: Kampjuni miġbura friska għandhom jiġu ffriżati malajr fin-nitroġenu likwidu, u mbagħad maħżuna f'-80 ° C għal żmien twil, evita l-iffriżar u t-tidwib ripetut tal-kampjuni;jew immedjatament xarrab il-kampjuni fis-soluzzjoni RNAlater tal-stabilizzatur tal-RNA (kampjuni tal-annimali).

3.Frammentazzjoni u liżi tal-kampjun insuffiċjenti jwasslu għall-imblukkar tal-kolonna tal-purifikazzjoni.

Suġġeriment: Meta tħin it-tessut, jekk jogħġbok kun żgur li t-tessut ikun mitħun biżżejjed, u ttrasferih malajr għall-Buffer PSL1 ippreparat minn qabel (ikkonferma li l-proporzjon korrett ta 'β-ME ġie miżjud, ara l-pass 1 tal-proċedura).

4.L-eluwent ġie miżjud b'mod żbaljat.

Suġġeriment: Kun żgur li ddH2O RNase-Free jitqattar fin-nofs tal-membrana tal-kolonna tal-purifikazzjoni.

5.Il-volum korrett ta 'etanol assolut ma ġiex miżjud ma' Buffer PSL2 jew Buffer PRW2.

Suġġeriment: Jekk jogħġbok segwi l-istruzzjonijiet, żid il-volum korrett ta 'etanol assolut ma' Buffer PSL2 u Buffer PRW2 u ħawwad sew qabel ma jintuża l-kit.

6.L-ammont ta 'kampjun tat-tessut mhuwiex xieraq.

Suġġeriment: Uża 50 mg ta 'tessut għal kull 500 μl ta' Buffer PSL1.L-użu ta 'tessut wisq inaqqas l-ammont ta' RNA estratt u l-purità tal-RNA li jirriżulta se titnaqqas ukoll.Nirrakkomandaw bil-qawwa li d-dożaġġ inizjali tal-kampjun m'għandux jaqbeż il-50 mg għal kull operazzjoni ta 'estrazzjoni ta' RNA.

7.Volum ta' elużjoni mhux xieraq jew elużjoni mhux kompluta.

Suġġeriment: Il-volum tal-eluwent tal-kolonna tal-purifikazzjoni huwa 50-200 μl;jekk l-effett ta 'elużjoni ma jkunx sodisfaċenti, huwa rakkomandat li jiġi estiż il-ħin f'temperatura tal-kamra wara li żżid ddH2O RNase-Free imsaħħan minn qabel, bħal 5-10min.

8.Il-kolonna ta 'purifikazzjoni għandha residwu ta' etanol wara l-ħasil b'BufferPRW2.

Suġġeriment: Jekk it-tubu vojt jiġi ċentrifugat għal 1 min u għad fadal etanol wara l-ħasil fil-Buffer PRW2, tista 'żżid il-ħin taċ-ċentrifugazzjoni tat-tubu vojt għal 2 min, jew poġġi l-kolonna tal-purifikazzjoni f'temperatura tal-kamra għal 5 min biex tneħħi kompletament l-etanol residwu.

9.Il-kit intuża ħażin.

Suġġeriment: Għal kampjuni ta 'pjanti ta' polisakkaridi polifenoliċi, bl-użu ta 'kits komuni bħal Plant Total RNA Isolation Kit jista' ma jkunx kapaċi jikseb kampjuni ideali ta 'RNA.Nirrakkomandaw li tuża Plant Total RNA IsolationKit Plus, li hija ddisinjata apposta għal kampjuni ta 'pjanti polisakkaridi polifenoliċi.Kit żviluppat apposta għall-estrazzjoni tal-RNA minn kampjuni tal-pjanti tal-polifenoli u tal-polisakkaridi.

Il-valur OD260/OD280 huwa baxx

L-eluzzjoni tal-RNA b'ddH2O u użata għall-qari tal-ispettrofotometru jirriżulta f'valuri baxxi ta' OD260/OD280.Nirrakkomandaw li tuża 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (minflok ddH2O Ħieles minn RNase biex elute RNA) biex tikseb valuri OD260/OD280 relattivament korretti, ara “Analiżi ta’ Konċentrazzjoni u Purifikazzjoni tal-RNA” f’paġna 19.

L-RNA purifikat huwa degradat

Il-kwalità tal-RNA purifikat hija relatata ma 'fatturi bħall-preservazzjoni tal-kampjun, il-kontaminazzjoni tal-RNase, u l-manipulazzjoni.

Analiżi tal-kawżi komuni:

1. Il-kampjuni tat-tessut ma ġewx maħżuna fil-ħin wara l-ġbir.

Rakkomandazzjoni: Jekk il-kampjuni tat-tessuti ma jintużawx fil-ħin wara l-ġbir, jekk jogħġbok aħżenhom f'nitroġenu likwidu f'temperatura baxxa immedjatament jew ittrasferihom għal -80 ° C għal ħażna fit-tul wara l-iffriżar ta 'malajr fin-nitroġenu likwidu, jew immedjatament għaddas il-kampjuni f'soluzzjoni RNAlater stabilizzatur RNA (kampjuni tal-annimali).Għall-estrazzjoni tal-RNA, ipprova uża kampjuni tat-tessut miġbura friska.

2.Ffriżar u tidwib ripetuti ta 'kampjuni tat-tessuti.

Suġġeriment: Meta taħżen kampjuni tat-tessuti, huwa aħjar li taqtgħu f'biċċiet żgħar għall-preservazzjoni, u oħroġ parti minnhom meta tużahom biex tevita d-degradazzjoni tal-RNA kkawżata minn iffriżar u tidwib ripetut tal-kampjuni.

3.RNase jiġi introdott fil-kamra tal-operazzjoni jew ingwanti li jintlibsu, maskri, eċċ.

Suġġeriment: L-esperimenti ta 'estrazzjoni ta' RNA jitwettqu l-aħjar f'operazzjonijiet ta 'RNA separati, u t-tabella tal-laboratorju għandha titnaddaf qabel l-esperiment, u ingwanti u maskri li jintremew għandhom jintlibsu matul l-esperiment biex tiġi evitata d-degradazzjoni tal-RNA ikkawżata mill-introduzzjoni ta 'RNase sa l-akbar punt.

4.Ir-reaġent huwa kkontaminat minn RNase waqt l-użu.

Suġġeriment: Ibdel b'serje ġdida ta 'kits ta' estrazzjoni ta 'RNA totali tal-pjanti għal esperimenti relatati.

5.It-tubi taċ-ċentrifugi u l-ponot tal-pipetta użati għall-manipulazzjoni tal-RNA huma kkontaminati b'RNase.

Suġġeriment: Kun żgur li t-tubi taċ-ċentrifugi, il-ponot tal-pipetta, il-pipetti, eċċ użati fl-estrazzjoni tal-RNA huma kollha Ħieles mill-RNase.

Manwali ta' Istruzzjonijiet:

Pjanti Total RNA Isolation Kit Plus Manwal ta 'Istruzzjoni