L-enzima Taq hot-start tintuża ħafna.Meta mqabbel ma 'polimerażi tad-DNA ordinarja, l-enżima Taq hot-start tista' tevita b'mod effettiv xi amplifikazzjoni mhux speċifika u l-formazzjoni ta 'dimeri primer, u tista' ttejjeb b'mod effettiv ir-rata ta 'suċċess tal-amplifikazzjoni tal-ġene fil-mira.Speċjalment fil-qasam tal-ittestjar ġenetiku, l-enzima Taq hot-start ġiet identifikata bħala standard obbligatorju fl-industrija, u l-polimerażi tad-DNA ordinarja m'għandhiex tintuża.Kif jidher minn hawn fuq, l-enzimi Taq hot-start jintużaw ħafna.Fil-preżent, hemm ħafna marki ta 'enżimi Taq hot-start fis-suq domestiku, iżda m'hemmx ħafna enzimi Taq hot-start bi kwalità għolja.Quddiem tant prodotti ta 'enżima Taq hot-start, kif għandna nagħżlu?

1. Agħżel l-enzima Taq hot-start b'effiċjenza għolja ta 'amplifikazzjoni

L-effiċjenza tal-amplifikazzjoni tal-PCR hija relatata mill-qrib mal-prestazzjoni tal-enzima Taq.Wara li sistema tajba ta 'reazzjoni ta' l-enżima Taq tiġi ottimizzata, l-effiċjenza ta 'amplifikazzjoni hija 'l fuq minn 95%, u l-firxa ta' amplifikazzjoni tal-ammont inizjali tal-mudell hija wiesgħa.Amplifikazzjoni sodisfaċenti tista 'tinkiseb meta l-kontenut tal-ġene fil-mira huwa baxx, u mhuwiex faċli li jiġi avvelenat meta l-ammont tal-mudell huwa għoli, u l-perjodu ta' amplifikazzjoni esponenzjali huwa twil.Għall-enzima Taq b'rendiment fqir, anke jekk is-sistema ta 'reazzjoni ġiet ottimizzata għal ħafna drabi, l-effiċjenza ta' amplifikazzjoni għadha inqas minn 90%, il-forma "S" tal-kurva ta 'amplifikazzjoni mhix ovvja, l-inklinazzjoni hija żgħira, u l-kurva hija ċatta.Meta l-ammont ta 'mudell huwa baxx, ma jistax jiġi amplifikat, u meta l-ammont ta' mudell huwa għoli, l-effett ta 'amplifikazzjoni mhuwiex ideali.Għalhekk, l-għażla ta 'DNA polymerases b'effiċjenza għolja ta' amplifikazzjoni hija kruċjali għas-suċċess ta 'PCR u qPCR.

2. Agħżel hot-start Taq enzyme b'qawwa qawwija ta 'enżima

Il-qawwa enżimatika tal-enzima Taq hija relatata mal-effiċjenza tal-amplifikazzjoni.Ġeneralment, aktar ma tkun b'saħħitha l-qawwa enżimatika ta 'l-enzima Taq hot-start, iktar ikun il-perjodu ta' tkabbir esponenzjali ta 'amplifikazzjoni tal-PCR, aktar kurva tipika ta' 'forma ta' S', iktar ikun għoli l-valur tas-sinjal tal-fluworexxenza, u aktar adattat għall-iskoperta tal-PCR multiplex.Il-polimerażi tad-DNA tad-ditta b'qawwa enżimatika dgħajfa ġeneralment jistgħu jappoġġjaw biss reazzjonijiet 2-plex.Meta tagħmel reazzjonijiet 3-plex, il-kurva ta 'amplifikazzjoni hija baxxa, il-valur tas-sinjal tal-fluworexxenza huwa baxx, u m'hemm l-ebda kurva ta' amplifikazzjoni tipika, għalhekk ir-riżultati huma diffiċli biex jiġġudikaw.

3. Agħżel enzima Taq hot-start b'sensittività għolja

B'mod ġenerali, DNA polymerase għandha effiċjenza għolja ta 'amplifikazzjoni u sensittività għolja, iżda hemm ukoll inkonsistenzi.Jekk l-abbundanza tal-ġene fil-mira tal-kampjun li jrid jiġi amplifikat hija baxxa, huwa rakkomandat li tiġi ttestjata s-sensittività tal-amplifikazzjoni tal-enzima Taq.L-aktar metodu ta 'skoperta komuni huwa li twettaq dilwizzjoni tal-gradjent ta' 10 darbiet jew 5 darbiet tal-framment tal-plasmid tal-ġene fil-mira, twettaq skoperta tal-PCR fid-dilwizzjoni aktar baxxa, u agħżel l-enzima Taq hot-start b'sensittività ogħla ta 'skoperta.

Minn dan ta 'hawn fuq jista' jidher li r-riċerkaturi jeħtieġ li jagħżlu skont ir-rekwiżiti sperimentali u l-kundizzjonijiet ta 'finanzjament tagħhom stess.Huwa aħjar li tagħmel esperiment ta 'amplifikazzjoni ta' dilwizzjoni tal-gradjent biex tiskopri l-effiċjenza tal-amplifikazzjoni u s-sensittività tal-enzima Taq hot-start.

Eżempju ta 'Foregene's Taq DNA Polymerase:

Foreasy HS Taq DNA Polymerase

Deskrizzjoni

Foreasy HS Taq DNA Polymerase hija DNA polimerażi espressa f'batterji ta' inġinerija ta' Escherichia coli permezz tat-teknoloġija tar-rikombinazzjoni tal-ġeni.L-enzima hija kkombinata ma 'buffffer ta' reazzjoni unika, li tagħmel il-prodott reżistenti ħafna u kompatibbli, u tista 'tuża direttament il-lisat tal-kampjun (sistema Foregene Lysis) bħala mudell għal reazzjonijiet ta' skoperta.

Applikazzjoni

PCR kwalitattiv u sejbien ta 'PCR kwantitattiv ta' mudelli purifikati u mudelli mhux purifikati.

Kontroll tal-Kwalità

1.Ebda attività nukleażi eżoġena misjuba

Metodu 2.PCR biex tiskopri DNA ġenomika residwa mingħajr ospitanti

3.Jista 'jamplifika b'mod effettiv il-ġeni b'kopja waħda fil-Ġenoma uman

4.Aħżen f'temperatura tal-kamra għal ġimgħa, l-attività ma tinbidel xejn

Dettalji tal-prodott: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/