W:Brother, it-traskrizzjoni inversa tlestiet, u finalment l-aħħar pass - PCR kwantitattiv fluworexxenti!Ħej, ħu, x'inhu PCR kwantitattiv f'ħin reali?
M:PCR dejjem taf, hux?
W: Taf, PCR hija r-reazzjoni tal-katina tal-polimerażi, u hija teknoloġija li żżid id-DNA!
M: Huwa kważi... Huwa metodu tekniku biex tkabbar is-sekwenza fil-mira għal aktar minn miljun darba permezz ta 'primers speċifiċi, iżda dan jindika biss il-preżenza jew in-nuqqas tas-sekwenza fil-mira, u ma jistax jiddetermina l-ammont tal-mudell inizjali.Il-PCR kwantitattiv tal-fluworexxenza huwa metodu tekniku żviluppat biex issolvi din il-problema.PCR fil-ħin reali u PCR tal-kwantità (qPCR) ġeneralment jirreferu għaliha.
W: Id-differenza mill-PCR ordinarja tinsab fil-kwantifikazzjoni tal-fluworexxenza?
M:Yes, jiġifieri, fl-istadju ta 'estensjoni ta' kull ċiklu tal-PCR, l-intensità tas-sinjal tal-fluworexxenza tiġi skoperta, u l-ammont inizjali tal-mudell jista 'jiġi kkalkulat skont il-bidla tal-intensità tas-sinjal.
W: Tħossok ikkumplikat!Għandi nikkalkula dan waħdi?
M: Dan jeħtieġ li titgħallem bil-mod, l-aħjar huwa li tkun kapaċi tifhem il-prinċipju.Issa tista 'tiffoka fuq il-valur CT l-ewwel, li hija data sperimentali relattivament intuwittivi, u d-daqs tagħha jikkorrispondi għad-daqs tal-ammont inizjali tal-mudell.Hemm ukoll graffs bħal kurvi ta 'amplifikazzjoni u kurvi ta' tidwib.Huma għandhom l-aħħar kelma dwar jekk l-esperiment tiegħek hux ta’ suċċess jew le.
W: Oh, ħu.Imbagħad jien ser nagħmel l-esperiment qPCR!
M:Oqgħod attent speċjali biex ma żżidx mudelli fiż-żona tar-reaġent, inkella t-taħlita mhux użata tiegħek tkun faċilment ikkontaminata!
W: Ghandek!

Real Time PCR Easyᵀᴹ-SYBR Green I Kit

Effiċjenza ogħla, speċifiċità akbar
Sensittività għolja, kompatibilità tajba