Għadek tuża Trizol biex tiġbed l-RNA?
Gosh, tħallinix ninkwieta dwar saħħtek!
Trizol wasal biex jiġi emarġinat, tgħidx li għadek fid-dlam?

Il-komponent ewlieni tar-reaġent Trizol huwa l-fenol, u reaġenti organiċi bħall-kloroform huma miżjuda wkoll fl-operazzjoni sperimentali.Espożizzjoni fit-tul se tikkawża ħsara lis-saħħa tiegħek, speċjalment kuntatt dirett mal-ġilda jista 'jikkawża ħruq kimiku serju u ċikatriċi permanenti.

Taħt ċirkostanzi normali, l-imsieħba tal-laboratorju jistgħu biss inaqqsu l-perikli billi jarmaw lilhom infushom bis-sħiħ (jilbsu kowtijiet tal-laboratorju, ingwanti u maskri).

U l-parir tiegħi lilek huwa: jekk jogħġbok ibdel Trizol direttament biex tevita ħsara mis-sors.

1. Il-prodott tal-ewwel ġenerazzjoni tal-estrazzjoni tal-RNA
Oħroġ fl-1987 (reaġenti Trizol)

vantaġġ:
Estrazzjoni aktar kompleta

Żvantaġġi:
Reaġenti tossiċi bħal guanidine isothiocyanate-phenol-chloroform huma meħtieġa;
Operazzjoni ineffiċjenti;
Ħtieġa li tuża DNase biex tneħħi l-kontaminazzjoni tad-DNA

2.Il-prodott tat-tieni ġenerazzjoni ta 'estrazzjoni ta' RNA
Oħroġ fl-1994 (QIAGEN RNeasy u l-biċċa l-kbira tal-prodotti domestiċi)

vantaġġ:
Huwa adottat metodu ċentrifugali tal-kolonna, li huwa faċli biex topera;

Żvantaġġ:
Ħtieġa li tiċċentrifuga biex tneħħi d-debris tat-tessut
Ħtieġa li tuża DNase biex tneħħi l-kontaminazzjoni tad-DNA

3.Il-prodott tat-tielet ġenerazzjoni tal-estrazzjoni tal-RNA
Ħruġ fl-2005 (QIAGEN RNeasy Plus u Foreġeneprodotti tas-serje tal-purifikazzjoni tal-RNA)

vantaġġ:
Uża direttament il-kolonna tat-tneħħija tad-DNA biex tneħħi d-DNA u d-debris tat-tessuti fl-istess ħin, billi tiffranka ħin u sforz;
Sikur u konvenjenti, m'hemmx bżonn li żżid kolonna tal-filtru u DNase biex tneħħi faċilment l-impuritajiet u tevita l-kontaminazzjoni tad-DNA

Ejja nħarsu lejn id-differenzi operattivi bejn il-prodott tal-ewwel ġenerazzjoni (Trizol), il-prodott tat-tieni ġenerazzjoni (RNeasy) u l-prodott tat-tielet ġenerazzjoni (Foregene) tal-estrazzjoni tal-RNA:

L-operazzjoni fil-figura hija ċara: il-prodott tat-tielet ġenerazzjoni għandu vantaġġi ovvji

Tliet kelmiet biss biex tiddeskrivi: faċli!Fast!Sigurtà

It-tabella PK tar-riżultati sperimentaligħalil-prodotti tal-ewwel ġenerazzjoni, tat-tieni ġenerazzjoni u tat-tielet ġenerazzjoni tal-estrazzjoni tal-RNA:

1. Eelettroforetogramma

L-ewwel ġenerazzjoni (1: Trizol)
It-tieni ġenerazzjoni (2:QIAGEN RNeasy)
It-tielet ġenerazzjoni (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

X'tip ta 'prodott huwa tajjeb, tkun taf b'paragun
RNA estratt bl-użu tal-kit Foregene
Mhux biss konċentrazzjoni għolja iżda wkoll integrità tajba

2.qPCR graph (graff tal-kurva tal-amplifikazzjoni)

L-ewwel ġenerazzjoni (Trizol)

It-tieni ġenerazzjoni (sema blumezziQIAGEN RNeasy-, aħmarmezziQIAGEN RNeasy +)

It-tielet ġenerazzjoni (blu tfisser Foregene, aħdar tfisser QIAGEN RNeasy plus)

(Nota: Il-graff QIAGEN RNeasy ta 'qPCR tat-tieni ġenerazzjoni tfisser li l-kit ma jżidx DNase u ma jneħħix il-kontaminazzjoni tad-DNA. Għalhekk, is-CT huwa ogħla u r-riżultat mhuwiex preċiż; QIAGEN RNeasy + ifisser li DNase ġie miżjud u l-kontaminazzjoni tad-DNA tneħħiet, u r-riżultat huwa preċiż)

Kemm jekk huwa elettroforetogramma jew graff tal-kurva ta 'amplifikazzjoni PCR kwantitattiva, il-kwalità tal-prodotti Foregene mhix inferjuri għal prodotti importati barranin.