Kitt għall-Iżolament tad-DNA virali u l-RNA Kits tal-Preparazzjoni tal-Purifikazzjoni tal-Estrazzjoni tad-DNA u tal-RNA virali
Speċifikazzjonijiet
50 Preparazzjoni, 200 Preparazzjoni
Viral RNA Nucleic acid Purification Extraction Isolation Kit juża l-kolonna spin u l-formula żviluppati minn Foregene, li jistgħu estratt b'mod effiċjenti RNA virali ta 'purità għolja u ta' kwalità għolja minn kampjuni bħal plażma, serum, fluwidu tal-ġisem mingħajr ċelluli, u supernatant tal-kultura taċ-ċelluli.Il-kit speċifikament iżid Linear Acrylamide, li jista 'faċilment jaqbad ammonti żgħar ta' RNA mill-kampjuni.RNA-Only Colonna tista 'tgħaqqad l-RNA b'mod effiċjenti.Il-kit jista 'jipproċessa numru kbir ta' kampjuni fl-istess ħin.
Il-kit kollu ma fihx RNase, għalhekk l-RNA purifikat mhux se jiġi degradat.Buffer viRW1 u Buffer viRW2 jistgħu jiżguraw li l-aċidu nuklejku virali miksub ħieles minn proteini, nukleażi jew impuritajiet oħra, li jistgħu jintużaw direttament għal esperimenti ta 'bijoloġija molekulari downstream.
Komponenti tal-kit
| Akrilamid lineari |
| Buffer DRL |
| Buffer RW1, Buffer RW2 |
| Ħieles mill-RNase ddH2O |
| Kolonna tad-DNA/RNA |
| Istruzzjonijiet |
Karatteristiċi u vantaġġi
■ Operazzjoni f'temperatura tal-kamra (15-25℃) matul il-proċess kollu, mingħajr banju tas-silġ u ċentrifugazzjoni f'temperatura baxxa.
■ Kit komplut RNase-Free, m'hemmx għalfejn tinkwieta dwar id-degradazzjoni tal-RNA.
■ Rendiment għoli ta 'aċidu nuklejku: Kolonna ta' DNA/RNA biss u formula unika jistgħu jippurifikaw DNA u RNA b'mod effiċjenti.
■ Kapaċità ta 'proċessar ta' kampjuni kbar: sa kampjuni ta '200μl jistgħu jiġu pproċessati kull darba.
■ Veloċità mgħaġġla: faċli biex topera u tista 'titlesta fi żmien 20 minuta.
■ Sigurtà: l-ebda reaġent organiku mhu meħtieġ.
■ Kwalità għolja: Il-frammenti tal-RNA purifikat huma ta 'purità għolja, ħielsa minn proteini u impuritajiet oħra, u jistgħu jilħqu diversi applikazzjonijiet sperimentali downstream.
Applikazzjoni tal-kit
Huwa adattat għall-estrazzjoni u l-purifikazzjoni ta 'aċidu nuklejku virali f'kampjuni bħal plażma, serum, fluwidu tal-ġisem mingħajr ċelluli u supernatant tal-kultura taċ-ċelluli.
Fluss tax-xogħol
Dijagramma
Ħażna u Żmien kemm idum tajjeb
■ Dan il-kit jista 'jinħażen għal 24 xahar taħt kundizzjonijiet niexfa f'temperatura tal-kamra (15-25 ℃);jekk jeħtieġ li jinħażen għal żmien itwal, jista 'jinħażen f'2-8℃.
■ Is-soluzzjoni Linear Acrylamide tista 'tinħażen f'temperatura tal-kamra għal 7 ijiem;wara li tirċievi l-kit, jekk jogħġbok oħroġ u aħżen f'-20°C.
■ Wara li żżid Linear Acrylamide ma 'Buffer DRL, tista' tinħażen f'2-8°C sa 48h.Jekk jogħġbok uża s-soluzzjoni lesta.
Gwida għall-Analiżi tal-Problema
Din li ġejja hija analiżi tal-problemi li jistgħu jiltaqgħu magħhom fl-estrazzjoni ta 'DNA/RNA virali, bit-tama li tkun ta' għajnuna għall-esperimenti tiegħek.Barra minn hekk, għal problemi sperimentali jew tekniċi oħra minbarra struzzjonijiet ta 'tħaddim u analiżi tal-problema, għandna appoġġ tekniku ddedikat biex ngħinuk.Jekk għandek xi bżonnijiet, jekk jogħġbok ikkuntattjana: 028-83360257 jew E-mail:
Tech@foregene.com.
L-ebda estrazzjoni ta 'aċidu nuklejku jew rendiment baxx ta' aċidu nuklejku
Normalment ikun hemm ħafna fatturi li jaffettwaw l-effiċjenza tal-irkupru, bħal: kampjun ta 'kontenut ta' aċidu nuklejku, metodu ta 'tħaddim, volum ta' elużjoni, eċċ.
Analiżi tal-kawżi komuni:
1. Twettqet banju tas-silġ jew ċentrifugazzjoni f'temperatura baxxa (4°C) matul il-proċedura.
Suġġeriment: Opera f'temperatura tal-kamra (15-25 ° C) matul il-proċess kollu, m'għandekx banju tas-silġ u ċentrifugazzjoni f'temperatura baxxa.
2. Il-kampjun inħażen b'mod mhux xieraq jew il-kampjun inħażen għal żmien twil wisq.
Rakkomandazzjoni: Aħżen kampjuni f'-80 ° C u evita l-iffriżar u t-tidwib ripetuti;ipprova uża kampjuni miġbura friska għall-estrazzjoni tal-aċidu nuklejku.
3. Liżi tal-kampjun insuffiċjenti.
Rakkomandazzjoni: Jekk jogħġbok kun żgur li l-kampjun u s-soluzzjoni tax-xogħol tal-liżi huma mħallta sewwa u inkubati f'temperatura tal-kamra (15-25 ° C) għal 10 minuti.
4. Żieda mhux korretta ta 'eluwent.
Suġġeriment: Kun żgur li ddH2O RNase-Free huwa miżjud qatra fin-nofs tal-membrana tal-kolonna tal-purifikazzjoni, u ma twaqqax fuq iċ-ċirku tal-kolonna tal-purifikazzjoni.
5. Il-volum korrett ta 'etanol assolut ma ġiex miżjud mal-Buffer RW2.
Suġġeriment: Jekk jogħġbok segwi l-istruzzjonijiet, żid il-volum korrett ta 'etanol assolut ma' Buffer RW2 u ħawwad sew qabel tuża l-kit.
6. Volum tal-kampjun mhux xieraq.
Suġġeriment: 200µl ta' kampjun jiġi pproċessat għal kull 500µl ta' Buffer DRL.L-ipproċessar tal-kampjuni eċċessiv jirriżulta f'rendiment aktar baxx ta 'estrazzjoni ta' aċidu nuklejku.
7. Volum ta' elużjoni mhux xieraq jew elużjoni mhux kompluta.
Rakkomandazzjoni: Il-volum tal-eluwent tal-kolonna tal-purifikazzjoni huwa 30-50μl;jekk l-effett ta 'elużjoni ma jkunx sodisfaċenti, huwa rakkomandat li jiġi estiż il-ħin f'temperatura tal-kamra wara li żżid ddH2O RNase-Free imsaħħan minn qabel, bħal 5-10min.
8. L-etanol jibqa’ fuq il-kolonna wara l-ħasil bil-Buffer RW2.
Suġġeriment: Jekk l-etanol jibqa 'wara ċ-ċentrifugazzjoni b'Buffer RW2 għal 2 minuti, il-kolonna tista' titqiegħed f'temperatura tal-kamra għal 5 minuti wara ċ-ċentrifugazzjoni biex tneħħi kompletament l-etanol residwu.
L-aċidu nuklejku purifikat huwa degradat
Il-kwalità tal-aċidu nuklejku purifikat hija relatata mal-preservazzjoni tal-kampjun, il-kontaminazzjoni tal-RNase, it-tħaddim u fatturi oħra.Analiżi tal-kawżi komuni:
1. Il-kampjuni miġbura ma ġewx maħżuna fil-ħin.
Suġġeriment: Jekk il-kampjun ma jintużax fil-ħin wara l-ġbir, jekk jogħġbok aħżen f'-80 ° C f'temperatura baxxa immedjatament.Għall-estrazzjoni tal-RNA, ipprova uża kampjuni miġbura friska.
2. Iġbor kampjuni u ffriża u ħoll ripetutament.
Suġġeriment: Evita l-iffriżar u t-tidwib (mhux aktar minn darba) waqt il-ġbir u l-ħażna tal-kampjuni, inkella r-rendiment tal-aċidu nuklejku jitnaqqas.
3. RNase jiġi introdott fil-kamra tal-operazzjoni jew ingwanti li jintremew, maskri, eċċ ma jintlibsux.
Rakkomandazzjoni: L-esperimenti ta 'estrazzjoni ta' RNA jitwettqu l-aħjar f'kamra separata ta 'operazzjoni RNA, u t-tabella tal-laboratorju għandha titnaddaf qabel l-esperiment.
Ilbes ingwanti u maskri li jintremew waqt l-esperiment biex tevita l-akbar degradazzjoni tal-RNA kkawżata mill-introduzzjoni ta 'RNase.
4. Ir-reaġent kien ikkontaminat b'RNase waqt l-użu.
Rakkomandazzjoni: Ibdel b'Kit ta' Iżolament tad-DNA/RNA Viral ġdid għal esperimenti relatati.
5. It-tubi taċ-ċentrifugi u l-ponot tal-pipetta użati għall-manipulazzjoni tal-RNA huma kkontaminati b'RNase.
Suġġeriment: Kun żgur li t-tubi taċ-ċentrifugi, il-ponot tal-pipetta, il-pipetti, eċċ użati għall-estrazzjoni tal-RNA huma kollha Ħieles mill-RNase.
L-aċidu nuklejku purifikat jaffettwa l-esperimenti downstream
DNA u RNA purifikati mill-kolonna tal-purifikazzjoni, jekk il-jone tal-melħ u l-kontenut tal-proteini huma għoljin wisq, jaffettwaw l-esperimenti downstream, bħal: amplifikazzjoni tal-PCR, traskrizzjoni inversa, eċċ.
1. Id-DNA u l-RNA elużi għandhom jonji tal-melħ residwi.
Suġġeriment: Kun żgur li l-volum korrett ta 'etanol assolut huwa miżjud mal-Buffer RW2, u aħsel il-kolonna tal-purifikazzjoni darbtejn bil-veloċità taċ-ċentrifugazzjoni speċifikata fl-istruzzjonijiet tat-tħaddim;Wettaq ċentrifugazzjoni biex timminimizza l-kontaminazzjoni tal-jone tal-melħ.
2. Id-DNA u l-RNA elużi għandhom residwi ta' etanol.
Suġġeriment: Wara li tikkonferma l-ħasil bil-Buffer RW2, wettaq ċentrifugazzjoni ta 'tubu vojt bil-veloċità taċ-ċentrifugazzjoni fl-istruzzjonijiet tat-tħaddim;jekk għad hemm residwu ta 'etanol, tista' tiċċentrifuga t-tubu vojt u mbagħad poġġih f'temperatura tal-kamra għal 5 minuti biex tneħħi r-residwu ta 'etanol bl-akbar limitu.
Manwali ta' Istruzzjonijiet:
Manwal ta' Istruzzjoni tal-Kit tal-Iżolament tad-DNA u tal-RNA virali
