QuickEasyᵀᴹ Real Time PCR Kit-Taqman
Deskrizzjonijiet
Il-2× QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman ipprovdut mill-QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman kit huwa sistema ta 'taħlita prinċipali ta' ġenerazzjoni ġdida ddisinjata għal reazzjoni ta 'amplifikazzjoni tal-PCR Real Time bl-użu ta' sondi fluworexxenti speċifiċi.Il-qalba tagħha Foregene HS Taq DNA Polymerase hija bbażata fuq modifika ta 'Antikorp, użata flimkien mas-sistema PCR ottimizzata aktar ta' Foregene, għandha speċifiċità ogħla u effiċjenza ta 'amplifikazzjoni.Meta mqabbel ma 'taħlita PCR ordinarja, għandha kapaċità ta' amplifikazzjoni aktar b'saħħitha u rata ta 'nuqqas ta' qbil aktar baxxa.Jista 'jintuża f'reazzjoni PCR kwantitattiva ta' fluworexxenza biex tnaqqas l-amplifikazzjoni mhux speċifika u ttejjeb l-eżattezza tal-PCR.Jista 'jtejjeb ħafna l-ispeċifiċità tal-prodott u s-sensittività tar-reazzjoni.Fl-istess ħin, ROX ġie pprovdut bħala żebgħa ta 'referenza interna.
Il-QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman kit għandu ambitu wiesa 'ta' applikazzjoni għall-ammont ta 'mudell, u jista' jikseb kurva standard tajba f'reġjuni kwantitattivi differenti, u jista 'jikkwantifika b'mod preċiż u jiskopri ġeni fil-mira b'ripetibbiltà tajba u kunfidenza għolja.
Speċifikazzjonijiet
200 Preparazzjoni,500 Preparazzjoni,1000 Preparazzjoni,2000 Preparazzjoni
Komponenti tal-kit
QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman(20μlsistema) | ||||
Kontenut tal-kit | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 Preparazzjoni | 500 Preparazzjoni | 1000 Preparazzjoni | 2000 Preparazzjoni | |
2×MalajrFaċliTM PCR reali Ħallat-Taqman | 1 mL×2 | 1.7 mL×3 | 1.7 mL×6 | 1.7 mL×12 |
20ׯebgħa ta' Referenza ROX | 200μL | 0.5 mL | 1 mL | 1 mL×2 |
Ħieles mid-DNase ddH2O | 1.7 mL | 1.7 mL×2 | 10 mL | 20 mL |
IFU | 1biċċa | 1biċċa | 1biċċa | 1biċċa |
Karatteristiċi u vantaġġi
■ Is-sistema unika ta 'ottimizzazzjoni tal-PCR tagħmel 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman aktar kompatibbli.
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymerase għandu effiċjenza ogħla ta 'amplifikazzjoni, sensittività ogħla ta' amplifikazzjoni, u speċifiċità ogħla ta 'amplifikazzjoni.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman juża sistema unika ottimizzata minn Foregene biex ittejjeb is-sensittività u l-ispeċifiċità tal-kxif tas-sonda speċifika għas-sekwenza, li tista 'tintuża għal determinazzjoni tal-varjazzjoni tal-ġenotipi u numru ta' kopji u tikseb riżultati preċiżi.
■ Dan il-prodott jiġi ma 'żebgħa ta' referenza interna ROX, li tista 'tintuża biex telimina l-isfond tas-sinjal u l-iżball tas-sinjal bejn il-bjar, li huwa konvenjenti għall-klijenti biex jużaw f'tipi differenti ta' strumenti PCR kwantitattivi.
Applikazzjoni tal-kit
■ PCR kwantitattiv ta' fluworexxenza għall-analiżi kwantitattiva tal-mudell;
■ Ċamplifikazzjoni PCR onvenzjonali;
■ Jista 'jintuża għall-iskoperta ta' alleli.
Ħażna u Żmien kemm idum tajjeb
Il-kit għandu jinħażen f'-20°C fid-dlam;jekk tintuża ta' spiss, tista' tinħażen ukoll f'4°C għal perjodu qasir ta' żmien (uża fi żmien 10 ijiem).
Prinċipji tad-disinn tal-primer tal-PCR Real Time
Forward Primer u Reverse Primer
Għal Real Time PCR, id-disinn tal-primer huwa importanti ħafna.Primers huma relatati mal-ispeċifiċità u l-effiċjenza tal-amplifikazzjoni tal-PCR, u jistgħu jiġu ddisinjati b'referenza għall-prinċipji li ġejjin:
Tul tal-primer: 18-30bp.
Kontenut GC: 40-60%.
Valur Tm: Softwer tad-disinn Primer, bħal Primer 5, jista 'jagħti l-valur Tm tal-primer.Il-valuri Tm tal-primers upstream u downstream għandhom ikunu qrib kemm jista' jkun.Il-formula tal-kalkolu Tm tista' tintuża wkoll: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Meta twettaq PCR, temperatura taħt il-valur Tm primer ta '5 °C ġeneralment tintgħażel bħala t-temperatura tal-ittemprar (iż-żieda korrispondenti fit-temperatura tal-ittemprar tista' żżid l-ispeċifiċità tar-reazzjoni tal-PCR).
Primers u prodotti PCR:
Disinn primer PCR amplifikazzjoni tul tal-prodott huwa preferibbilment 100-150bp.
Primers tad-disinn fiż-żona strutturali sekondarja tal-mudell għandhom jiġu evitati kemm jista 'jkun.
Evita l-formazzjoni ta’ 2 bażijiet komplementari jew aktar bejn it-truf 3′ ta’ primers upstream u downstream.
Primer 3′ bażi terminali ma tistax tkun preżenti bi 3 G jew C konsekuttivi addizzjonali.
Il-primers infushom ma jistgħux ikollhom strutturi komplementari, inkella se tiġi ffurmata struttura ta 'hairpin, li taffettwa l-amplifikazzjoni tal-PCR.
ATCG għandu jitqassam bl-aktar mod uniformi possibbli fis-sekwenza tal-primer, u l-bażi terminali 3′ għandha tiġi evitata bħala T.
Appendiċi 1:Pakkett ta' supplimenti ta' komponenti ta' Cell Direct RT-qPCR Kit
1.Soluzzjoni tal-Liżi taċ-Ċelloli
| |||
Komponenti tal-kit (sistema ta’ liżi ta’ 24-bir/bir) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
PartiI | Buffer CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
PartiII | Eraser tad-DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT Ħallat
| |
Komponenti tal-kit (20 μl sistema ta' reazzjoni) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5 × Ħallat RT Dirett | 800 μl |
Ħieles mill-RNase ddH2O | 1.7 ml × 2 |
| ||
Komponenti tal-kit (20 μl sistema ta' reazzjoni) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 T | 1000 T | |
2 × Dirett qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
50 × Żebgħa ta 'Referenza ROX | 40 μl | 200 μl |
Ħieles mill-RNase ddH2O | 1.7 ml | 10 ml |