Introduzzjoni:

Molekuli RNA jistgħu jinteraġixxu b'mod estensiv ma 'molekuli bijoloġiċi oħra, bħal proteini, DNA u RNA, u għalhekk jeżistu f'ċelloli u organiżmi fil-forma ta' kumplessi makromolekulari.Fost dawn, kumplessi RNA-proteina huma l-eżistenza u l-funzjoni ta 'RNA Waħda mill-forom importanti ta'.L-RNA pull-down huwa metodu klassiku għall-iskrinjar u l-identifikazzjoni tal-molekuli RNA, speċjalment il-proteini li jinteraġixxu tal-molekuli lncRNA, u huwa rikonoxxut mill-maġġoranza tar-riċerkaturi u ġurnali akkademiċi awtorevoli internazzjonali.Illum FORREGENE se jaqsam miegħek il-prinċipju sperimentali u l-proċess tekniku ta 'l-RNA pull-down, forsi tista' tużah

1. Il-prinċipju sperimentali tat-teknoloġija RNA pull down:

Traskrizzjoni u sintesi in vitro ta 'frammenti ta' lncRNA jew lncRNA fil-mira ttikkettjati bil-bijotina (inklużi frammenti ta 'RNA użati bħala kontrolli pożittivi u negattivi), u inkuba b'estratti taċ-ċelluli;uża żibeġ manjetiċi ankrati bl-avidin biex tiġbor kumplessi RNA-protein jew RNA-RNA, Wara ħasil bir-reqqa, il-kumpless jiġi eluwit.Jekk tiskopri l-molekula fil-mira tal-proteina li jinteraġixxi ma 'lncRNA, wettaq elettroforesi tal-proteini fuq il-prodott RNA-pull down, skopri l-proteina fil-mira permezz ta' tbajja tal-fidda, u aqta 'l-ġell għall-ispettrometrija tal-massa;iwettaq ukoll direttament il-verifika tal-western blot fuq il-prodott pull-down;jekk jinstab Għall-molekuli fil-mira tal-RNA li jinteraġixxu mal-lncRNA, il-prodotti RNA-pull down huma soġġetti għal estrazzjoni tal-RNA u ssir skoperta speċifika tal-qRT-PCR.

2. RNA pull down proċess ta 'esperiment tat-teknoloġija:

3. Servizz tekniku għal RNA pull down ta' FOREGENE:

Kultura taċ-ċelluli

Preparazzjoni ta 'estratt ta' proteina totali taċ-ċelluli/nukleari/plażma

RNA pull down esperiment

elettroforeżi SDS-PAGE, tebgħa tal-fidda

Spettrometrija tal-massa u esperimenti WB

Rapport sperimentali

4. Każ sperimentali

Il-figura li ġejja turi r-riżultati tal-ġibda 'l isfel tal-RNA ta' FJ Bio-Bio u l-iskoperta tal-elettroforeżi SDS-PAGE, li fiha l-vleġġa ħamra timmarka l-faxxa tad-differenza:

Il-grupp ta 'riċerka tal-Professur Song Xu tal-Università ta' Sichuan akkumula 15-il sena ta 'akkumulazzjoni fit-tul fil-qasam tar-riċerka tal-lncRNA.Foregene Bio u l-grupp ta 'riċerka tal-Professur Song Xu ikkooperaw biex iniedu t-teknoloġija RNA pull down ta' lncRNA, li tagħtik riżultat sodisfaċenti għall-esperiment tiegħek.