Lnc-RT Heroᵀᴹ I (B'gDNase) (Super Premix għal sinteżi ta' cDNA tal-ewwel linja minn lncRNA)
Speċifikazzjonijiet
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (B'gDNase) hija sistema ta' traskrizzjoni inversa żviluppata apposta għal lncRNA biex tneħħi malajr il-kontaminazzjoni tad-DNA ġenomika.5 × gDNase Mix jista 'malajr tneħħi l-ġenoma li jifdal fl-RNA f'42 ° C għal 2 minuti, tevita b'mod effettiv l-interferenza tal-ġenoma fuq ir-riżultati tal-qPCR.
5×L-RT HeroTM Mix fih Foregene LncRNA Reverse Transcriptase żviluppat b'mod speċjali minn Foregene, li huwa tip ġdid ta 'reverse transcriptase speċifikament għal lncRNA u mudelli oħra ta' kumplessi ta 'RNA twal, b'affinità RNA aktar b'saħħitha u effiċjenza ogħla ta' reġistrazzjoni ta 'treġġigħ lura.Is-sistema ottimizzata tagħmel ir-rata ta 'traskrizzjoni inversa aktar mgħaġġla u tista' faċilment traskrivi mudelli ta 'RNA b'kontenut għoli ta' GC u struttura sekondarja kumplessa.L-ewwel sinteżi ta 'cDNA tal-linja tista' titlesta f'42°C fi 15-il minuta.
Komponenti tal-kit
| 5× Ħallat gDNase |
| 5× L-RT HeroTM Ħallat |
| Ħieles mill-RNase ddH2O |
| Istruzzjonijiet |
Karatteristiċi u vantaġġi
■Kapaċità effiċjenti biex tneħħi l-gDNA, li tista 'tneħħi l-gDNA fil-mudell fi żmien 2 minuti.
■ Jista 'jreġġa' lura b'mod effiċjenti t-traskrizzjoni tal-lncRNA.Meta l-prodott ta 'traskrizzjoni inversa jkun soġġett għal qPCR, il-valur Ct huwa aktar baxx minn dak tas-sistema ta' traskrizzjoni inversa konvenzjonali.
■ Sistema effiċjenti ta 'traskrizzjoni inversa, tieħu biss 15-il minuta biex tlesti s-sintesi tal-ewwel linja cDNA.
■ Mudelli kumplessi: mudelli b'kontenut għoli ta 'GC u struttura sekondarja kumplessa jistgħu wkoll jitreġġgħu lura b'effiċjenza għolja.
■ Sistema ta 'traskrizzjoni inversa ta' sensittività għolja, mudelli ta 'livell pg jistgħu wkoll jiksbu cDNA ta' kwalità għolja.
■ Is-sistema ta 'traskrizzjoni inversa għandha stabbiltà termali għolja, it-temperatura ottimali ta' reazzjoni hija 42℃, u għad għandu prestazzjoni tajba ta 'traskrizzjoni inversa f'50℃.
Applikazzjoni tal-kit
lncRNA analiżi kwantitattiva relattiva.
lncRNA analiżi kwantitattiva assoluta.
Jista 'janalizza malajr u b'mod preċiż traċċa RNA bħal virus RNA.
Traskrizzjoni inversa ta 'mudelli ta' RNA b'kontenut għoli ta 'GC jew struttura sekondarja kumplessa.
Fluss tax-xogħol
Ħażna u Żmien kemm idum tajjeb
Il-kit għandu jinħażen f'-20°C. Aħżen il-prodott fi friġġ b'temperatura kostanti f'-20°C immedjatament wara l-irċevuta.Jekk il-kundizzjonijiet tal-ħażna huma xierqa, il-prodott ma jiddegrada l-ebda prestazzjoni matul il-perjodu ta 'validità ta' sena.
Gwida għall-Analiżi tal-Problema
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-amplifikazzjoni speċifika
1. Disinn tal-primer mhux raġonevoli
Rakkomandazzjoni: Iddisinja primers skont il-prinċipji tad-disinn tal-primer.
2. Residwi tal-ġenoma.
Suġġeriment: Kun żgur li l-ewwel pass tat-temperatura tar-reazzjoni tat-tneħħija tal-gDNA huwa 42 ° C, u l-ħin ta 'reazzjoni jista' wkoll jiġi estiż għal 5min.
L-ebda sinjal ta 'amplifikazzjoni minn RT-qPCR
1. RNA huwa degradat.
Rakkomandazzjoni: Il-materjal għall-estrazzjoni tal-RNA għandu jkun frisk kemm jista 'jkun, u għandu jintuża RNA ta' kwalità għolja u ta 'purità għolja.
2. L-RNA fih inibituri.
Rakkomandazzjoni: L-inibituri tat-traskrizzjoni inversa ġeneralment jinkludu SDS, melħ tal-guanidine, EDTA, eċċ. Huwa rrakkomandat li taħsel il-preċipitat tal-RNA b'70% etanol biex tneħħi l-inibituri.
3. Kwistjonijiet tad-disinn tal-primer.
Rakkomandazzjoni: Skont il-prinċipju tad-disinn tal-primer, iddisinja mill-ġdid il-primers għall-ispezzjoni.
Il-faxxa fil-mira tidher fil-kontroll vojt
1. Kontaminazzjoni ta 'għodod operattivi jew reaġenti.
Rakkomandazzjoni: Ir-reaġenti jew it-tagħmir kollu għall-esperiment għandhom jiġu awtoklavi.Oqgħod attent u ġentili meta timmaniġġja biex tevita li l-kampjuni tad-DNA jiġu miġbuda fil-pipetta jew imxerrda barra mit-tubu taċ-ċentrifuga.
2. Kontaminazzjoni seħħet waqt il-preparazzjoni tas-sistema ta 'reazzjoni PCR.
Rakkomandazzjoni: Ħu l-prekawzjonijiet meħtieġa meta timmaniġġa, bħal: tilbes ingwanti tal-lattiċe, uża ponot tal-filtri.Uża Real Time PCR Mix f'sistema ta' prova ta' kontaminazzjoni.
3. Il-primers huma degradati.
Suġġeriment: Uża l-elettroforeżi SDS-PAGE biex tiskopri jekk il-primers humiex degradati, u ibdel b'primers ġodda għal esperimenti ta 'skoperta ta' fluworexxenza.
Manwal ta' Istruzzjoni:
