ForeDirect RT-qPCR Kit
Deskrizzjoni tal-Kit:
◮Għal amplifikazzjoni diretta ta 'RNA f'ħin reali minn kollezzjonijiet ta' swab mingħajr proċessi ta 'purifikazzjoni ta' RNA.Dan il-kit ilesti ċ-ċikli qRT-PCR fi żmien siegħa.It-taħlita ta' l-enżimi hija taħlita ottimizzata ta' Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, inibitur ta' RNase.Il-Buffer tar-Reazzjoni fih il-komponenti kollha meħtieġa, inklużi l-komponenti tal-buffer ottimizzati, Mg2+, dUTP, u dNTPs.
Deskrizzjoni
ForeDirect RT-qPCR Kit huwa ddisinjat għal amplifikazzjoni diretta ta 'RNA f'ħin reali minn kollezzjonijiet ta' swab mingħajr proċessi ta 'purifikazzjoni ta' RNA.Dan il-kit ilesti ċ-ċikli qRT-PCR fi żmien siegħa.It-taħlita ta' l-enżimi hija taħlita ottimizzata ta' Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, inibitur ta' RNase.Il-Buffer tar-Reazzjoni fih il-komponenti kollha meħtieġa, inklużi l-komponenti tal-buffer ottimizzati, Mg2+, dUTP, u dNTPs.
Speċifikazzjonijiet
100T
Komponenti tal-kit
| Aġent tar-rilaxx tal-aċidu nuklejku |
| Protettant RNA |
| 2 × RT-qPCR Buffer |
| Taħlita ta' Enżimi (Taq & M-MLV) |
| Istruzzjonijiet |
Applikazzjoni PCR
1. Ladarba t-tubi tar-reazzjoni tal-PCR ikunu ġew ċentrifugati fil-qosor, poġġihom fit-tank tal-kampjun tal-istrument tal-amplifikazzjoni.
2. Protokoll termali
| Pass | Temperatura | Ħin | Ċikli | |
| 1 | Traskrizzjoni inversa | 50℃ | 15-il minuta | 1 |
| 2 | Denaturazzjoni minn qabel | 95℃ | 1 min | 1 |
| 3 | Denaturazzjoni | 95℃ | 10 sekondi | 42 |
| 4 | Ittemprar/Estensjoni | 60℃ | 30 sekonda | |
Nota:Sinjal fluworexxenti ġie skopert immedjatament wara l-pass ta 'estensjoni ta' kull ċiklu.
3. Wara l-issettjar, issalva l-fajl u mexxi l-programm ta 'reazzjoni.
Passi Operattivi
Qabel il-preparazzjoni tar-reaġenti, ir-reaġenti kollha fil-kit għandhom jinħallu f'temperatura tal-kamra u mħallta bil-mod.
Preparazzjoni tar-reaġent
1. Ipprepara t-Taħlita tar-Rilaxx tal-Aċidu Nukleiku
| Komponent | Volum għal kull Kampjun jew Kontroll |
| Aġent tar-rilaxx tal-aċidu nuklejku | 5μL |
| Protettant RNA | 0.5 μL |
2. Ipprepara t-Taħlita ta' Reazzjoni
| Komponent | Volum għal kull Kampjun jew Kontroll |
| 2 × RT-qPCR Buffer | 15 μL |
| Taħlita ta' Enżimi (Taq & M-MLV) | 1.5 μL |
| Primers u Sondi | 1μL |
Ħażna u Żmien kemm idum tajjeb
-Il-kit għandu jinħażen f'-20± 5℃.Il-perjodu ta' validità huwa ta' 12-il xahar.
-Evita ċikli ripetuti ta' ffriżar u tidwib (<5 ċikli).
